Peter Parker è uno studente di college, vive nel quartiere Queens a New York con gli zii Mary e Ben ed è innamorato della ragazza della porta a fianco, la bella Mary Jane Watson. Ha un grande amico Harry Osborn e, fuori dalla scuola, lavora come fotografo per il Daily Bugle dell'editore J.Jonah Jameson. Durante una visita con la sua classe a un laboratorio di ricerche scientifiche, è morso da un ragno geneticamente modificato. Peter scopre ben presto di aver acquisito poteri superumani: con forza e agilità può aderire e muoversi su qualsiasi superficie; ha, in più, una accresciuta sensibilità, "il senso del ragno", che lo mette in guardia dai pericoli. Da questo momento la sua vita cambia per sempre. Dopo la morte dello zio Ben, Peter, nelle nuove vesti di Spider-Man, decide di dedicare la sua esistenza alla lotta contro il crimine e di usare i suoi poteri per difendere i più deboli.